黑膠蟲是一種生物還是非生物,學(xué)術(shù)界至今還有爭議,這里暫且將其認(rèn)作是一種微生物。黑膠蟲往往來源于血清,是一種常見的細(xì)胞污染物,與細(xì)胞共生,隨細(xì)胞傳代而傳代,通??股貙ζ錈o效。黑膠蟲與細(xì)胞競爭性生長,對細(xì)胞生長不利,嚴(yán)重時導(dǎo)致細(xì)胞死亡。目前很多細(xì)胞存在被黑膠蟲污染的現(xiàn)象,對細(xì)胞培養(yǎng)及其后續(xù)實驗造成了極大地影響。
黑膠蟲特征
• 培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基沒有區(qū)別;
• 低倍鏡下是黑色的點點和細(xì)胞碎片沒有區(qū)別;
• 高倍鏡下可以觀察到點狀片狀的游動小體,能模仿細(xì)胞碎片和細(xì)胞分泌物做布朗運動;
• 與細(xì)胞的數(shù)量成反比,細(xì)胞越多,它越少,細(xì)胞越少它越多,更換培養(yǎng)液或洗滌細(xì)胞不能將其去除;
• 細(xì)胞生長緩慢,同時營養(yǎng)消耗快,需頻繁更換培養(yǎng)液,細(xì)胞狀態(tài)越養(yǎng)越差。
解決方法
• 若細(xì)胞狀態(tài)尚可,最為快速有效的處理方式就是采用黑膠蟲清除劑對黑膠蟲進行清除,同時確保培養(yǎng)體系中的血清必須為無黑膠蟲和原蟲污染的優(yōu)質(zhì)血清,然后增加細(xì)胞密度,繼續(xù)培養(yǎng)2-3代可清除;
• 若細(xì)胞狀態(tài)很差,建議消殺后丟棄。
• 黑膠蟲污染的細(xì)胞培養(yǎng)液不渾濁,顏色、透明度無明顯變化,細(xì)胞增殖旺盛后會自然消失,更換血清外無需特殊處理可以增加細(xì)胞的種板密度以提高細(xì)胞的生存率,對于黑膠蟲的污染目前只能采用高品質(zhì)的血清進行預(yù)防。
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